淺看γ干擾素elisa試劑盒正確的操作規(guī)程

　　γ干擾素elisa試劑盒是指用于盛放檢測化學(xué)成分、藥物殘留、病毒種類等化學(xué)試劑的盒子。干擾素試劑盒使用采用進(jìn)口抗體包被，以確保實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性與可靠性。干擾素試劑盒吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體。適用于血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種標(biāo)本類型。

　　γ干擾素elisa試劑盒檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。

　　γ干擾素elisa試劑盒的操作規(guī)程：

　　1、待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。

　　2、酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。

　　3、洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

　　4、陰性對照孔每孔加入PBS50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl

　　5、酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

　　6、洗板，同（4）。

　　7、每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液100μl。

　　8、酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

　　9、洗板，同（4）。

　　10、每孔加TMB顯色液100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。

　　11、每孔加100μl2mol/LH2SO4終止反應(yīng)。

　　12、分別測450nm吸光值W1和630nm吸光值W2，醉終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

　　13、數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。