HNP1-3 人中性粒細(xì)胞防御素1-3elisa應(yīng)用操作步驟

HNP1-3 人中性粒細(xì)胞防御素1-3elisa應(yīng)用操作步驟：

夾心法，一般的操作步驟為:

將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗體;

加入待測檢體，檢體中若含有待測的抗原，則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié);

洗去多余待測檢體，加入另一種對抗原專一的一次抗體，與待測抗原進(jìn)行鍵結(jié);

洗去多余未鍵結(jié)一次抗體，加入帶有酶的二次抗體，與一次抗體鍵結(jié);

洗去多余未鍵結(jié)二次抗體，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果;

間接法，一般的操作步驟為：

將已知的抗原固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余的抗原。

加入待測檢體，檢體中若含有待測的一次抗體，則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗原進(jìn)行專一性鍵結(jié)。

洗去多余待測檢體，加入帶有酶的二次抗體，與待測的一次抗體鍵結(jié)。

洗去多余未鍵結(jié)二次抗體，加入酶底物使酶呈色，藉儀器測定塑膠盤中的吸光值，以評估有色終產(chǎn)物的含量即可測量待測抗體的含量。

競爭法，其操作步驟為：

將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗體

加入待測檢體，使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié)

加入帶有酶的抗原，此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié)，由于塑膠孔盤上固著的抗體數(shù)量有限，因此當(dāng)檢體中抗原的量越多，則帶有酶的抗原可鍵結(jié)的固著抗體就越少，亦即，兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵結(jié)，即所謂競爭法之由來。